Оплодотворение яйцеклеток in vitro

Оплодотворение яйцеклеток in vitro проводится в эмбриологической лаборатории путем объединения подготовленных сперматозоидов с ооцитами с целью оплодотворения. Оплодотворение in vitro осуществляют обычно в течение 2-6 часов после пункционного изъятия яйцеклетки. Оплодотворение in vitro («в пробирке») подразумевает добавление к подготовленным яйцеклеткам суспензии сперматозоидов в количестве 50-100 тыс. на каждую яйцеклетку. Контакт сперматозоидов и яйцеклеток происходит при температуре 37°С, на культуральной среде, помещенной в термостат, при поддержании необходимых постоянных условий. Оплодотворение наступает после проникновения в яйцеклетку одного из сперматозоидов.

Современная гинекология характеризуется бурным развитием и широким распространением методов экстракорпорального оплодотворения. Созданы специальные инкубаторы, которые поддерживают условия, идентичные естественным условиям оплодотворения в организме женщины. На чашки Петри, содержащие питательную среду с подготовленными к оплодотворению ооцитами, добавляется концентрат из сперматозоидов в соотношении 50-100 тыс. сперматозоидов на каждую яйцеклетку. Затем чашки Петри помещаются в инкубатор, поддерживающий постоянные температурные, влажностные показатели и концентрацию СО2. Искусственно созданные условия инкубатора и культуральной среды аналогичны естественному микроклимату фаллопиевых труб. Культуральная среда содержит необходимую концентрацию белков, аминокислот, пирувата, солей, глюкозы и т. д., обеспечивая оптимальную возможность для оплодотворения и ранних этапов развития эмбриона in vitro.

Через 16-18 часов эмбриолог просматривает чашки под микроскопом и определяет количество оплодотворенных яйцеклеток, повторную оценку оплодотворения проводят спустя 24 часа после объединения половых клеток. Оплодотворенная яйцеклетка представляет собой зиготу, содержащую два пронуклеуса – ядра с генетическим материалом отца и матери. При их слиянии образуется новое ядро, содержащее уникальный генетический набор. Неоплодотворенные или аномально оплодотворившиеся яйцеклетки (например, с тремя пронуклеусами) отбраковываются и не используются на дальнейших этапах.

Вероятность оплодотворения in vitro составляет 65-70%. При отсутствии оплодотворения ввиду низких функциональных или морфологических характеристик сперматозоидов решается вопрос о проведении ИКСИ либо использовании спермы донора.