ПЦР диагностика одной инфекции

Обследование на инфекцию методом ДНК-диагностики основано на выявлении в исследуемом материале ДНК возбудителя. Самым распространенным методом ДНК-диагностики является ПЦР-исследование (полимеразная цепная реакция). В гинекологии ПЦР-диагностика используется для распознавания микоплазмоза, уреаплазмоза, генитального герпеса, хламидиоза, папилломовирусной, цитомегаловирусной и других половых инфекций. Материалом для ПЦР-исследования в гинекологии служит соскоб клеток из влагалища, шейки матки и уретры.

Перед сдачей и исследованием ПЦР-соскоба женщине запрещается мочиться за 3 часа до анализа (если предстоит забор материала из уретры), за сутки до анализа проводить туалет половых органов дезинфицирующими средствами и антибактериальным мылом, спринцеваться, использовать вагинальные свечи. Половые контакты исключаются за 36 часов до взятия соскоба. ПЦР-диагностика должна выполняться до лечения уросептическими и антибактериальными препаратами и до начала менструации.

Забор материала производится из цервикального канала, иногда из уретры стерильной цито-щеткой или ложечкой Фолькмана. Перед взятием соскоба гинеколог ватным тампоном удаляет слизь и выделения из наружного зева шейки матки, поскольку их примесь может привести к ложному результату анализа. Для обнаружения инфекционных возбудителей важно наличие в материале эпителиальных клеток мочеиспускательного и цервикального каналов, поэтому инструментом производится легкий соскоб эпителия или вращательные движения. Полученный материал с дистального конца инструмента помещают в стерильный контейнер с физраствором, который может храниться в холодильнике не более 4-х суток.

В ходе лабораторной ПЦР-диагностики происходит многократное удвоение ДНК возбудителя (при ее наличии в забранном материале). При количестве ДНК 10 8 — 10 12 возможным ее определение ПЦР-методом. Таким образом, ПЦР позволяет выявить даже единичного возбудителя: если хотя бы часть его ДНК присутствует в биологическом материале, она будет многократно размножена и обнаружена. С помощью метода ПЦР успешно диагностируются хронические и бессимптомно протекающие инфекции.

ДНК-диагностика является одним из самых современных методов диагностики в мире, точность ее результатов достигает 97%. От забора материала до выдачи результатов ПЦР-анализа проходит 1-2 дня.

К ограничениям метода относится невозможность проведения ПЦР-контроля излеченности, поскольку после гибели возбудителей в материале могут оставаться кусочки их ДНК. Поэтому для выявления жизнеспособных размножающихся микроорганизмов после лечения гинекология применяет бактериологический посев.

Кроме того, положительный ПЦР-результат на уреаплазму и микоплазму не является критерием наличия заболевания, т. к. эти микроорганизмы относятся к условно-патогенным, а для диагностики и лечения важен не факт их наличия, а количественный показатель. Эффективность ПЦР снижается при наличии обильных или гнойных выделений.

Поэтому во всех случаях для исключения ложноположительных результатов ПЦР-диагностика должна дополняться культуральными посевами на питательные среды.